为什么流式细胞术是细胞周期分析的理想选择 当用细胞周期试剂染色时,细胞中的 DNA 会以化学计量方式结合染料,也就是说染料结合量与每个细胞中存在的 DNA 量成比例。分布在细胞周期各个阶段的DNA含量直方图是根据流式分析中的细胞数量与线性荧光数据得...
1.按照实验要求进行细胞铺板,待细胞长到需要的密度收细胞。 2.收细胞步骤和普通处理细胞相同,需要注意的是在做细胞周期时,需要将原培养基收集到离心管内,消化时间到后加入原培养基中止消化,最后一起离心。 3.离心完后去掉上清,加入1ml冰浴的PBS缓冲液重悬,并转移到1.5ml Ep管内,低温离心机4℃、1000g离心5min,...
流式细胞术是一种很常见的实验方法,对于细胞周期来说,一般是采用经典的碘化丙啶(PI)染色的方法进行周期分析, PI可以和双链DNA结合产生荧光,荧光强度和DNA含量呈正比,因此,我们可以根据DNA含量的多少来进行细胞周期的分析。接下来以我个人做周期的经验来分享实验步骤及注意事项。实验步骤1.按照实验要求进行细胞铺板,...
流式细胞术是一种可以对细胞进行快速、定量分析和分选的技术。通过利用不同荧光物质标记的单克隆抗体,流式细胞术能够检测细胞周期中各个阶段的特异性标志物,从而实现对细胞周期的精确分析。流式细胞术还具有高通量、高灵敏度和高准确性的优点,能够在短时间内处理大量样本,并获取丰富的数据信息。 细胞周期检测点的流式...
流式细胞术是一种很常见的实验方法,对于细胞周期来说,一般是采用经典的碘化丙啶(PI)染色的方法进行周期分析, PI可以和双链DNA结合产生荧光,荧光强度和DNA含量呈正比,因此,我们可以根据DNA含量的多少来进行细胞周期的分析。接下来以我个人做周期的经验来分享实验步骤及注意事项。
因此通过流式细胞术PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可分析细胞周期各阶段的百分比。需要注意的是,PI不能通过细胞膜完整的细胞,因此在标本制备的时候,必须先用乙醇或者其他破膜试剂增强细胞膜的通透性,才能使PI进入细胞内与细胞内的DNA结合。 二、实验试剂和仪器设...
1.细胞制备 a.G0 abl pre-B细胞:如步骤A所示,用伊马替尼处理abl pre-B细胞。将1 mL伊马替尼处理过的细胞置于24孔板中进行辐照。 b.G0 MCF10A细胞:如步骤A所示,在不含EGF的MCF10A培养基同步化细胞,置于24孔板中进行辐照。 c.增殖期abl pre-B细胞:将细胞(2 × 106/mL)重悬于预热的DMEM培养基中,置于24...
细胞仍然是二倍体 S——DNA合成期,是细胞周期的最关键时期,DNA的量经过复制增加一倍,DNA也从二倍体到四倍体的连续增加 G2——DNA合成的后期,此时DNA 的合成已经完成,为下一步有丝分裂做准备,细胞为四倍体 M——细胞分裂期,在分裂完成之前仍然为四倍体 一般细胞周期检测试剂盒采用PI染色,但是PI由于波谱较宽,对...
答:流式细胞术已成为细胞周期和倍体分析最常用的检测方法,但用于细胞周期和倍体分析的标本其采集,制备,仪器检测和分析等各个环节均与检测结果的准确性密切相关.值得注意的有以下几点:(1)当标本自溶,脱蜡不完全,细胞数过少(低于10^5个细胞),肿瘤细胞含量很低(异倍体细胞数占总细胞数10%以下)时,结果必须放弃或...
流式细胞术是一种很常见的实验方法,对于细胞周期来说,一般是采用经典的碘化丙啶(PI)染色的方法进行周期分析, PI可以和双链DNA结合产生荧光,荧光强度和DNA含量呈正比,因此,我们可以根据DNA含量的多少来进行…