科研实验流式细胞仪测细胞凋亡FITC/P.一、FITC/PI检测细胞凋亡原理: (1)凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidyIserine, PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面。 (2) Annexin V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合,将Annexin V 进行荧光素FITC标记,利用流式细胞仪可以更早地检测细胞凋亡...
Annexin V-Biotin试剂 SAv-FITC试剂 PI或7-AAD核酸染料 Binding Buffer缓冲液📝操作步骤: 使用Annexin V-Biotin试剂进行检测时: 用1xBinding Buffer缓冲液洗细胞一次,去上清。 加入100μl 1xBinding Buffer缓冲液溶解SAv-FITC试剂0.5g,加入到细胞管中。 轻轻混匀,加入5μl PI,室温(20-25℃)避光处放置15分钟。
Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(PS)高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期,只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)翻向外侧,用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针,并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用,能够准确区分正常细胞、凋亡早期和凋亡晚期细胞。
在进行流式细胞仪检测细胞凋亡时,我遇到了一些困惑。我使用的是AnnexinV-FITC凋亡试剂盒,采用AnnexinV/PI双染方法检测细胞凋亡。然而,当我得到凋亡散点图后,发现关于1,2,4象限代表的细胞类型说法不一。根据试剂盒说明书,1象限代表细胞收集过程中机械性损伤的细胞,2象限代表继发性坏死细胞,4象限...
Annexin V-FITC套装 实验步骤 1.细胞处理 首先,将培养好的细胞分到不同的培养皿中,添加凋亡诱导剂,以诱导细胞凋亡。凋亡诱导剂的种类和浓度应根据实验的需要来确定。通常可选择小分子化合物、放射线等方式来诱导细胞凋亡。 2.收集细胞 处理好的细胞经过一定时间的培养后,使用离心机将细胞沉淀下来,并用PBS缓冲液洗涤...
注:本产品不适用于自动调电压的流式细胞仪,如 BD 的 C6;如需用于此类仪器,推荐 Annexin V-FITC/PI apoptosis kit (C6 专用) (AP101C)。 产品特点 操作简便,15分钟即可完成染色; 分群清晰,结果稳定可靠; 独家搭配阳性质控液,补偿调节不再困难。
Annexin V-APC 价格: ¥1500/盒 产品详情: 包装规格:30T/60T/100T 用途:流式检测 货号:AP105-100-AVA 品牌:联科生物 产地:浙江杭州 是否进口:否 Annexin V-PE 价格: ¥1720/盒 产品详情: 包装规格:30T/60T/100T 用途:流式检测 货号:AP104-100-AVP 品牌:联科生物 产地:浙江杭州 是否进口:否 流...
Annexin V-FITC溶液 碘化丙锭(PI)溶液 实验步骤 1.细胞收集:悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.用预冷,4℃无菌的PBS充分洗涤细胞两次,用250μ结合缓冲液重新悬浮细胞,调节其浓度为1×106/ml。 3.取100μl的细胞悬液于5ml流式管中,加入5μl Annexin V-FITC和10μ...
结合缓冲液、Annexin V-FITC/PI 双染试剂盒(或其他凋亡检测试剂)。 流式细胞仪及配套软件。 离心机、移液器等实验器材。 试剂配制 按照试剂盒说明书配制结合缓冲液、染色工作液等。 二、细胞处理 细胞收集 如果是悬浮细胞,直接离心收集细胞。对于贴壁细胞,先用胰酶等消化液消化使其脱壁,然后离心收集。 离心条件一...
取100µl的细胞悬液于5ml流式管中,加入5µlAnnexinV/FITC混匀后于室温避光孵育5分钟。 06 加入5µl的碘化丙锭溶液(PI),并加400µlPBS,立刻进行流式或荧光显微镜检测。 07 流式细胞仪检测,保存数据。 08 取100µl的细胞悬液于5ml流式管中,加入5µlAnnexinV/FITC混匀后于室温避光孵育5分钟。