提取原代小胶质细胞是进行相关研究的重要步骤之一,本文将详细介绍原代小胶质细胞提取的方法和步骤。 材料和仪器 •新鲜解剖的小鼠或大鼠脑组织 •离心管和离心机 •细胞培养液(DMEM/F12等) •消化酶(如胰蛋白酶和DNA酶) •细胞培养皿或培养板 •显微镜 •血红蛋白溶解液 •离心管和适当的离心速度 ...
原代培养法是目前最常用的小胶质细胞提取方法之一。具体步骤如下: (1)将新鲜脑组织切成小块并去除血管、脑膜等组织。 (2)将组织块置于含有消化酶(如0.25% 胰蛋白酶)和DNA 酶的消化液中,在37℃下消化4~5次。 (3)将消化后的混合物通过筛网过滤,得到单个小胶质细胞。 (4)将单个小胶质细胞接种到含有营养物质...
选取适宜的年龄段：新生动物的脑部组织中含有丰富的小胶质细胞前体细胞，这为提取高产量的原代小胶质细胞提供了良好的基础。一般来说，出生后 1-3 天的小鼠或大鼠幼崽是较为理想的选择，此时小胶质细胞处于活跃的增殖期，且细胞的纯度相对较高。二、优化分离方法 组织解离技巧：采用温和而有效的组织解离方法是关键的...
首先,使用适当的梯度离心方法,如 Percoll 梯度离心,可以根据细胞的密度差异将小胶质细胞与其他脑细胞分离开来。Percoll 是一种具有连续密度梯度的介质,通过调整其浓度和离心条件,可以使小胶质细胞富集在特定的分层中。然后,通过过滤去除残留的组织碎片和大颗粒杂质,常用的过滤器孔径为 40-70μm,可以有效地保留小胶质细...
原代小胶质细胞在一定条件下是可以传代的，但传代次数通常比较有限。1.传代的可行性 当原代小胶质细胞在...
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