大肠杆菌感受态的制备、重组DNA的转化和抗药性筛选 基因克隆(又名分子克隆，DNA克隆)(genecloning)通过体外重组技术,将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。基因克隆的核心---体外重组(Recombination):人工将一段目的DNA插入一个载体的过程。重组DNA技术(又名基因工程)(re...
2.在转化体系中形成DNA-抗DNase的羟基-磷酸钙复合物能粘附于细菌表面，经过42℃短时间热休克（heatshock）处理，细胞膜的液晶结构发生扰动，出现间隙促进感受态细胞吸收DNA复合物。3.在丰富培养基上生长1小时后，球状细胞复原并分裂增殖，重组子中的基因在转化细菌中得到表达，在选择性培养(selectiveculture)平板上即可...
近日,北京化工大学徐福建教授和段顺教授等人在Science China Materials发表研究论文,采用渗透交联的方法开发了一种具有抵抗成纤维细胞入侵、牙槽骨保存和抗菌的多功能Janus结构复合水凝胶。 本文要点 1)通过将氧化的海藻酸钠溶液渗透到含有羧甲基壳聚糖的高黏性纳米羟基磷灰石悬浮液中来构建水凝胶。 2)通过这个过程制备出的...
本发明的多核苷酸在遗传免疫方面的应用优选使用一种合适的传递方法,例如直接将质粒DNA注射进肌肉(Wolff等《人类分子遗传学》(1992)1:363,Manthorpe等,《人类基因治疗》(1983)4:419);将DNA与特异性蛋白载体复合后进行传递(Wu等,《生物化学杂志》(1989)264:16985),将DNA与磷酸钙共沉淀(Benvenisty&Reshef,《美国科...
此类取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基 (例如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸 酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰氨 基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮...
非病毒性的基因导入方法有将表达制粒直接给予肌肉的方法(DNA疫苗法)、脂质体法、脂转染法、微注射法、磷酸钙法、电穿孔法等,其中优选DNA疫苗法、脂质体法。 将全长cDNA导入来自人的细胞、来自非人的哺乳动物细胞(例如来自豚鼠、大鼠、小鼠、鸡、兔、猪、绵羊、牛、猴的细胞等)中的来自单核细胞的细胞、来自淋巴结...
苯甲酰硫酸琥珀酰亚胺酯(通过半胱氨酸残基结合)、N-羟基琥珀酰亚胺(通过赖氨酸残基)、戊二醛、琥珀酸酐、SOCl2或R1N=C=NR,其中R和R1独立的是低级烃基基团,将相关的抗原结合到在被免疫的物种中是免疫原性的蛋白质上,是有用的,所述蛋白质例如,匙孔血蓝蛋白、血清白蛋白、牛甲状腺球蛋白或大豆胰蛋白酶抑制物。
可通过使用本领域中多种可用的技术将该多核苷酸导入到合适的宿主细胞中,这些技术为例如,铁传递蛋白聚阳离子介导的DNA转移、用裸核酸或包裹的核酸进行的转染、脂质体介导的DNA转移、DNA包被的乳胶颗粒(latex bead)的胞内运输、原生质体融合、病毒感染、电穿孔、基因枪、磷酸钙介导的转染等。 本文所描述的核酸组合物...
本发明进一步涉及与具有核酸裂解活性的化合物(例如核糖核酸酶或DNA内切核酸酶,如脱氧核糖核酸酶;DNase)偶联的拮抗剂。多种放射性同位素可用于生产放射偶联的拮抗剂。实例包括Ar211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32和Lu的放射性同位素。拮抗剂与细胞毒性剂的偶联物可以用多种双功能蛋白质偶联剂...
由亚克隆分泌的单克隆抗体可用常规抗体纯化方法如亲和层析(例如采用蛋白-A或蛋白G Sepharose)或离子交换层析、羟基磷灰石层析、凝胶电泳、透析从培养基、腹水或血清中分离。 编码单克隆抗体的DNA可用常规方法很容易的分离和测序(如利用能与编码鼠抗体重链和轻链的基因特异结合的寡核苷酸探针)。杂交瘤细胞是这类DNA的优选...