从1986 年 FDA 批准第一款单克隆抗体起已有36年的历史,抗体类药物每年占FDA新药批准的近五分之一。抗体药物的活性除了由氨基酸序列决定外,翻译后修饰亦对活性有重大影响,在众多的蛋白质翻译后修饰(PTM)中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,占到所有PTM的50%以上,其糖...
抗体N糖基化就是抗体蛋白的氨基酸残基共价结合N糖的过程，N型糖苷键对肽链中的氨基酸的排列顺序有特殊的要求，只与Asn-X-Ser/Thr序列中的天冬酰胺的氨基形成糖苷键（其中X代表除Pro以外的任一氨基酸），该氨基酸位点就称为抗体N糖基化位点。抗体药物糖基化修饰可能会影响抗体蛋白的免疫原性和半衰期等，从而影响药物...
有文献[8]报道半糖基化抗体可以使其ADCC 及CDC 功能明显减弱,提示对非糖基化重链比例的控制具有一定的意义。 1.3 N-糖结构与ADCC、ADCP 的关系 Fc 上N-糖可含有通过α1-6 岩藻糖转移酶转移至核心N-乙酰葡糖胺上的核心岩藻糖[9],而核心岩藻糖的缺失可使单抗Fc 与FcγRⅢa 结合力明显增强,进而导致其...
抗体N糖基化就是抗体蛋白的氨基酸残基共价结合N糖的过程,N型糖苷键对肽链中的氨基酸的排列顺序有特殊的要求,只与Asn-X-Ser/Thr序列中的天冬酰胺的氨基形成糖苷键(其中X代表除Pro以外的任一氨基酸),该氨基酸位点就称为抗体N糖基化位点。抗体药物糖基化修饰可能会影响抗体蛋白的免疫原性和半衰期等,从而影响药物的安...
2.形成不同N-聚糖治疗性抗体的因素 (1)细胞系:目前中国仓鼠卵巢(CHO)是用来表达治疗性抗体最广泛的细胞系,研究发现不同的细胞系会导致治疗性抗体的糖基化谱发生改变。例如小鼠细胞两种不同的细胞系SP2/0和NSO,在Fc区会产生两种不同的糖基化聚糖,分别是α,1,3半乳糖糖基化和N-羟乙酰神经氨酸(NGNA); ...
N-糖基化抗体也可以用于免疫沉淀实验,以富集特定的N-糖基化蛋白质,便于进一步的质谱分析。 5.质谱分析: 质谱分析可以用于精确地确定N-糖基化修饰的位置和程度。 以上就是使用N-糖基化修饰检测用抗体的一般步骤。这些抗体为我们提供了强大的工具,帮助我们更好地理解N-糖基化在生物过程中的角色。发布...
蛋白质糖基化简介 糖基化修饰占到所有PTM(Post-translational Modification,翻译后修饰)的50%以上,对于治疗性蛋白药物(如重组蛋白药物、抗体药物),通过对免疫原性、半衰期、效应因子作用等的影响,对其安全性和有效性起到重要作用。从1986年批准第一个抗体药物OKT3至今,FDA已经批准了63个抗体药物和14个融合蛋白药物,以及...
糖基化通常发生在抗体的N（天冬氨酸）和O（丝氨酸或苏氨酸）位点。N-糖基化常发生在天冬氨酸和丝氨酸之间的特定序列（N-X-S/T），而O-糖基化则主要发生在苏氨酸和丝氨酸残基上。对这些糖基化位点的检测和分析对于确保抗体药物的质量和功效至关重要。对抗体药物的糖基化位点进行分析的方法有很多。一种常用的...
抗体药物N-糖基化的分析和控制 糖基化修饰占到所有PTM(Post-translational Modification,翻译后修饰)的50%以上,对于治疗性蛋白药物(如重组蛋白药物、抗体药物),通过对免疫原性、半衰期、效应因子作用等的影响,对其安全性和有效性起到重要作用。从1986年批准第一个抗体药物O...
一、罗氏PD-L1抗体Atezolizumab 罗氏的PD-L1抗体药物采用最直接的办法,突变掉298位的N-糖基化位点,仍采用动物细胞表达。 二、韩美LAPS技术平台 韩美的LAPS技术平台,应用于多肽(胰岛素、GLP-1等),其中糖尿病药物于2015年以44亿美元的天价卖给赛诺菲。LAPS基于Fc的长效机制,通过化学偶联而非融合表达。Fc段采用大肠杆菌...