连接反应需要引物的5’磷酸基团。如果需要将合成的引物退火直接连接相应的载体上，引物需要磷酸化。...
首先变性之后，加几个较低退火温度的循环，目的是从模板中将目的序列的含量扩大（可能也有非特异性的扩增...
亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。 第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5′-羟基的保护基团DMT,获得游离的5′-羟基。 第二步,合成DNA的原料,亚...
可以无论引物退火温度如何，都可以采用通用退火温度60℃。另外对不同GC含量的兼容性也很好。保真度达300X...