目的建立实时定量荧光反转录-聚合酶链反应(RQRT—PCR)的方法并用来检测急性髓系白血病(AML)-M2患者中AML1/ETO融合基因的拷贝数,观察患者体内融合基因阳性率、该融合基因转录水平的变化情况及AML1/ETO融合基因阳性患者对治疗的反应。方法利用含AML1/ETO融合基因的Kasumi-1细胞株构建质粒标准品并制作标准曲线,检测25例...
针对影响qRT-PCR反应的RT/Taq DNA聚合酶、Buffer缓冲液、上下游引物、探针浓度,选用L9(34)正交表进行正交设计(表2),进行4因素3水平正交实验对qRT-PCR反应体系进行优化,9个处理组各重复3次,并对qRT-PCR反应条件进行系统优化,qRT-PCR反应在Bio RAD CFX96型实时荧光定量PCR仪上进行。 表2 实时荧光定量RT-PCR反应...
除引物外,PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、dNTP和Taq 酶等成分。 (3)检测PCR产物用到的荧光探针指的是荧光标记的4种脱氧核苷酸(或dNTP)。随着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐增大,荧光信号的变化与PCR产物的形成完全同步。 (4)qRT-PCR是以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物的总量,qRT...
Semi-QRT-PCR is a rapid,simple and highly specific means in analysis of gene expression level in recent years. 半定量逆转录聚合酶链式反应(Semi-QRT-PCR)以其灵敏、简捷及特异性高等优点已逐渐成为分析基因表达水平的一种有效手段。补充资料:聚合酶链式反应 分子式:CAS号:性质:又称基因体外扩增技术或核...
(75/76),qRT-PCR为88.16%(67/76),2种方法相关性与一致性较差(R~2=0.326和CCC=0.438).Bland Altman分析显示绝对偏倚为0.5log copies/mL,相对偏倚为0.86%.配对t检验显示,结果有统计学差异(t=3.654,P<0.001).在非HBV感染对照患者中,SAT和qRT-PCR均未检出HBV RNA阳性.结果提示,在HBV DNA≥100IU/mL的CHB...
目的建立实时定量荧光反转录-聚合酶链反应(RQRT—PCR)的方法并用来检测急性髓系白血病(AML)-M2患者中AML1/ETO融合基因的拷贝数,观察患者体内融合基因阳性率,该融合基因转录水平的变化情况及AML1/ETO融合基因阳性患者对治疗的反应.方法利用含AML1/ETO融合基因的Kasumi-1细胞株构建质粒标准品并制作标准曲线,检测25例...
疫苗效力疫苗质量控制目的建立快速检测甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应(PMA-qRT-PCR)方法.方法比较叠氮溴化丙锭(PMA)浓度,光解时间,孵育温度和时间,以及不同灭活方式,pH值和添加剂预处理对PMA-qRT-PCR法检测的影响;进行线性,平行性,灵敏度,重复性,相关性,特异性和初步...
中应用SAT与qRT-PCR检测血清HBV RNA,其相关性与一致性较好，在HBV DNA<100IU/mL的CHB 患者中相关性与一致性存在一定差异。关键词：乙型肝炎病毒;核糖核酸;定量反转录-聚合酶链反应;实时荧光核酸恒温扩增试验 中图分类号：R373.2文献标识码：A Evaluation of simultaneous amplification testing and quantitative rever...
Objective To develop a real-time fluorescent quantitative RT-PCR (qRT-PCR) method for qualitative and quantitative Chikungunya virus (CHIKV) analysis. Methods Based on the systematic analysis of the genomic sequences of Chikungunya and its related arboviruses, ...
PCR 反应的 RT/Taq DNA 聚合酶,Buffer 缓冲液,上下游引 物,探针浓度,选用 L(9 34)正交表进行正交设计(表 2),进行 4 因素 3 水平正交实验对 qRT-PCR 反应体系 进行优化,9 个处理组各重复 3 次,并对 qRT-PCR 反应条件进行系统优化 ,qRT - PCR 反应在 Bio RAD CFX96 型实时荧光定量 PCR 仪上进行....