但这个酶早在实际生产中得到了应用,将同样的带有重组蛋白基因质粒的大肠杆菌BL-21(DE3)做固定化,30℃左右生产可以达到半年时间。 因此我们在思考这个酶在破胞&热处理后的失活原因(破胞后不做热处理的粗酶,酶活还是正常的)。 有一种观点是说大肠杆菌宿主内的蛋白酶将外源重组蛋白降解了,因此我想请教各位的是,大...
质粒pGH/BL21在大肠杆菌中表达条件的研究成中芹,王雪峰,朱江3(苏州大学生命科学学院,苏州215007)摘要:目的寻找质粒pGH/BL21在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法当它在大肠杆菌中表达时,考查不同IPTG诱导浓度及不同的诱导时间对表达产物的影响,表达产物的量以SDS-PAGE电泳方法分析。结果该基因的最佳表达条件为:IPTG诱导浓...
BL-21(DE3),通过卡那霉素抗性平板筛选,得到产乳酸的大肠杆菌基因工程茵.经IPTG诱导后,SDS— PAGE电泳,检测到目的蛋白条带,一乳酸脱氢酶比酶活力达到9.44U/mL.该基因工程菌通过摇瓶发酵,一乳酸 产量达到3L,成功构建出一条在大肠杆菌中生产一乳酸的新途径. 关键词:大肠杆菌;L一乳酸脱氢酶基因;鼠李糖乳杆菌 中...
1. 重组小鼠Fas配体在大肠杆菌中的表达和纯化 2. 重组人促甲状腺激素α亚基在大肠杆菌中的表达 3. 鸡β-防御素-1基因(Gal-1)在大肠杆菌中的融合表达与纯化 4. 重组人干扰素大肠杆菌高效表达系统的建立 5. 腈水合酶在大肠杆菌中的表达纯化 6. L-乳酸脱氢酶在大肠杆菌BL-21(DE3)中的表达 7. 重组...
目的克隆和表达人可溶性OX40L重组蛋白(sOX40L),探讨OX40L信号在T细胞对乳腺癌细胞反应中的协同刺激效应.方法运用基因工程技术在大肠杆菌中表达人重组融合蛋白GSTsOX40L,Westernblot分析表达蛋白的特异性;采用体外T细胞和乳腺癌细胞混合培养体系,观察对T细胞生长和增殖的影响.结果构建了GSTsOX40L原核表达体系,从而进行...
幽门螺杆菌高毒力株检测试剂的制备材料,其特征是:1)菌株、质粒:幽门螺杆菌NCTC11637,大肠杆菌BL-21、载体pET-42a;2)引物:带有酶切位点的六对引物,下
coli BL-21(DE3) 重组人PD-L1在大肠杆菌BL-21中的表达、纯化和鉴定 2. Escherichia coli 大肠埃希氏菌, 大肠杆菌 3. Studies of Eliminating E.coli and M.hyorhinis s Contamination from BHK-21 Cell with Baytril; Baytril对BHK-21细胞大肠杆菌、猪鼻支原体污染清除研究 4. Escherichia coli K12 大肠...
1. Expression of human OX40L in BL-21 E.coli and studies on its biological function; 人OX40L在BL-21大肠杆菌中的表达和生物学功能研究2) BL-21 大肠杆菌BL-21 1. Expression and identification of rhPD-L1 in E. coli BL-21(DE3) 重组人PD-L1在大肠杆菌BL-21中的表达、纯化和鉴定 更多...
他汀类药物是目前应用广泛、效果理想的降脂药物,醇脱氢酶是该药物催化合成过程中的关键酶。研究人员对酿酒酵母醇脱氢酶基因进行PCR,并将其导入大肠杆菌BL-21中,构建重组醇脱氢酶工程菌,利用LB培养基可大量生产醇脱氢酶。请回答下列问题:(1) 对酿酒酵母醇脱氢酶基因进行PCR时,需要先设计引物,引物应选择图1中的。
他汀类药物是目前应用广泛、效果理想的降脂药物,醇脱氢酶是该药物催化合成过程中的关键酶。研究人员对酿酒酵母醇脱氢酶基因进行PCR,并将其导入大肠杆菌BL-21中,构建重组醇脱氢酶工程菌,利用LB培养基可大量生产醇脱氢酶。请回答下列问题: (1)对酿酒酵母醇脱氢酶基因进行PCR时,需要先设计引物,引物应选择图1中的___...