1. 合理的凋亡诱导处理方式:设置药物诱导时间和浓度梯度预实验,以确定特定细胞系中药物诱导 caspase-3 活化的最佳条件,并用 staurosporine #9953(1μM for 3hours)或 etoposide #2200(25μM for 5 hours)处理 HeLa,NIH/3T3 或 C6 cells 作为 cleaved caspase-3 的阳性参照。 2. 贴壁细胞发生凋亡后会变得难...
Caspase-3是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在细胞凋亡过程中起到关键作用,被广泛用作凋亡的生物标志物。Caspase-3在凋亡过程中,被剪切成分子量分别为17kDa(p17)和12kDa(p12)的两个片段,并易位至细胞核。Caspase-3经过剪切激活后,可以激活 caspase-6、-7 和 -9,形成
caspase-3最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly(ADP-ribose) polymerase)，该酶与DNA修复、基...
Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD)，也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。Caspase-3是细胞凋亡过程中最关键的执行分子(key executioner)之一，可以剪切细胞凋亡过程中的许多关键蛋白，例如PARP。Caspase-3的激活需要从没有活性的全长Caspase-3(35kD)，在Asp...
活细胞Caspase-3活性与Annexin V细胞凋亡检测试剂盒(Caspase-3 Activity and Apoptosis Detection Kit for Live Cell)是基于新型的具有细胞膜通透性的Caspase-3/7绿色荧光底物GreenNuc™ Caspase-3 Substrate联合细胞凋亡红色荧光探针Annexin V-mCherry来检测培养细胞中Caspase-3活性和细胞凋亡的红绿荧光双染试剂盒,可用...
caspase-3是最常见的caspase执行者,活化的caspase-3负责切割众多底物,通过激活一系列信号通路诱导凋亡,包括DNA片段化、细胞骨架重建、凋亡小体形成、磷脂酰丝氨酸(PS)外翻到细胞膜外等。最后,凋亡细胞被吞噬细胞识别并吞噬。在所有caspase家...
Caspase-3、6和7都属于执行Caspase，它们不象启动Caspase，不能被募集到或结合起始活化复合体，而是依赖...
Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。 1 Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化的Caspase-3及对...
一、Western blot 分析Procaspase-3 的活化,以及活化的Caspase-3 及对底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]等的裂解。 方法:收集细胞→PBS 洗涤→抽提细胞裂解液→蛋白定量→SDS-PAGE 电泳→硝酸纤维素膜或PVDF 膜转移→5 %脱脂奶粉封闭,室温1.5~2 h 或4 °C 过夜→Caspase-3 多抗...