1.对于内源的 Co-IP 检测应该用 10 cm 皿来培养目的细胞,并维持较好的生长状态; 2.如果该实验用于新蛋白的鉴定,应注意抗体重链和轻链的影响; 3.该实验不能确定蛋白之间的相互作用是直接还是间接的。 常见问题 1、阴性有较强的条带 这有可能是结合较弱或...
说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋...
注：本表显示的物种是指验证或寻找这些物种内的相互作用蛋白，目前Co-IP及IP-MS实验在原生质体、烟草叶片系统中实施。实验信息 实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告，检测结果可在线查看或打印，并永久保留。Co...
除此之外CO-IP实验还会设置一个阳性对照组（Input组），Input组为直接利用抗体X（抗体Y）对细胞裂解液进行WB检测，验证细胞裂解液中存在蛋白X(抗体Y)。在某些CO-IP实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行蛋白X和蛋白Y的WB检测，该对照组称为output组。免疫共沉淀的实验流程 免疫共沉淀实验流程为：收集蛋白样品—...
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤 一、原理: 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如...
蛋白实验 | 免疫共沉淀 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。原理 如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接…
确切来说，试剂盒的50T代表着能够完成50次免疫沉淀反应，而实际上免疫共沉淀实验需要设置多个组别进行对照验证，因此具体能够完成多少次Co-IP实验由设计方案决定，一般至少需要设置阴性对照、阳性对照、实验组三个组别。※ 预清除步骤的作用是什么？必须要进行吗？这个步骤的目的是为去除样本中可与protein A/G琼脂糖珠...
此外，IP: His的结果与之一致。因此，证明了LRP6和CTSD之间存在相互作用，且与LPR的1427 P和CTSD的316 G有关。总之，Co-IP实验结果分析不难，关键是熟知Co-IP的实验原理和实验步骤以及实验分组的含义，再通过例子仔细耐心地实践分析即可，希望本文能对大家阅读Co-IP实验结果有所帮助。汉恒生物专注病毒包装，可提供...
(一)Co-IP 优点 1.操作流程较为简便,不需要事先制备大规模蛋白表达文库。 2.可以研究具有修饰的目的蛋白。 3.能够对间接相互作用的蛋白进行捕获,比如对蛋白复合物的多种成分进行鉴定。 (二)Co-IP 缺点 1.检测不到低亲和力和瞬时的互作。 2.不能判断直接互作或是间接互作。 3.需要再实验前预测目的蛋白 ,已...