免疫共沉淀质谱联用(IP-MS)实验,可用来确认抗体与预期靶标的特异性相互作用,是确认抗体与预期靶标直接结合的重要方法。点击进入赛默飞官网查看IP-MS抗体验证详情!
免疫共沉淀常用于检验生理状态下蛋白质间的相互作用,通过与质谱(MS)联用可以用于鉴定发现新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分别标记实验组和对照组细胞后进行Co-IP实验,依靠抗原与抗体之间的专一性反应分离得到免疫复合物;再通过LC-MS/MS来定性/定量检测免疫复合物中的蛋白;当实验组与对照组中某个蛋白质的含量...
方法运用酶切技术结合一代测序构建携带Flag标签RCC2蛋白过表达载体,慢病毒包装感染构建Flag-RCC2过表达的MDA-MB-468稳转细胞株。采用Flag抗体凝胶珠亲和沉淀,收集蛋白样品进行高敏感度质谱鉴定。生物信息蛋白组学分析互作蛋白组,包括GO注释...
免疫沉淀(IP)是基于免疫学原理和传统亲和纯化方法开发的用来检测、分离、纯化蛋白质的一种技术。将免疫沉淀获得的蛋白质通过质谱分析进一步鉴定,即IP质谱分析,IP质谱分析已广泛应用于蛋白种类、含量、表达量变化及蛋白相互作用研究。 免疫沉淀质谱联用技术首先通过免疫沉淀法获得目的蛋白(抗原),再将目的蛋白酶切成多肽片段...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是一项基于抗体特异性识别特定抗原的这一原理研究蛋白质相互作用的经典方法。免疫共沉淀常用于检验生理状态下蛋白质间的相互作用,通过与质谱(MS)联用可以用于鉴定发现新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC技术和Co-IP-MS技术结合可用于高通量定量分析在特定情况下蛋白的互作蛋白网。
2. 取等量蛋白混合,用诱饵蛋白抗体做Co-IP;3. 收集Co-IP后的蛋白液,胰酶酶切,LC-MS/MS鉴定和定量蛋白。 SILAC-IP * 应用背景 免疫共沉淀(Co-IP)在分离纯化蛋白复合物过程中,不可避免地会出现非特异结合蛋白,这些蛋白会一并被质谱鉴定出来,成为假阳性的互作蛋白,影响后续挑选验证。 传统的判断假阳性互作...
免疫共沉淀质谱联用(IP-MS)实验,可用来确认抗体与预期靶标的特异性相互作用,是确认抗体与预期靶标直接结合的重要方法。点击进入赛默飞官网查看IP-MS抗体验证详情!