光转换荧光蛋白PA-GFP是首个用于光活化研究的光学指示剂，它源于Aequorea victoria水母的蛋白突变体。在基础设计中，野生型绿色荧光蛋白(GFP)被改造为阴离子态，形成PA-GFP。在常态下，野生型GFP有两个吸收峰，分别位于395和475nm，但通过突变，PA-GFP降低了对475nm的吸收，并几乎不吸收450~550nm的光线...
当Kaede蛋白受到紫外光激发时，会发生从绿色到红色的光转换过程，这一过程使得红/绿比显著增加约2000倍，特别适用于标记亚细胞器和整个细胞。光转化后的Kaede蛋白，其吸收和发射光谱曲线发生了显著变化，如图所示，绿色虚/实线代表转化前，红色虚/实线代表转化后，两者之间60nm的发射峰差异明显，如图5a到5d...
“我们是第一个创造光转换荧光蛋白的人,这种荧光蛋白的光学特性可以用绿光和橙光来控制,而不是蓝紫辐射。这样做的好处是对细胞的伤害最小。我们使用新的蛋白质来观察活细胞的细胞骨架随时间的变化。”俄罗斯科学院谢米亚金-奥夫钦尼科夫生物有机化学研究所高级研究员,领导RSF项目。 为了制造这种荧光蛋白,科学家们使用...
科学家们从一种名为Pectiniidae的石化珊瑚虫中发现了一种独特的单体荧光蛋白——Dronpa，这标志着新型可调控荧光蛋白的崭新纪元。Dronpa的特点在于其卓越的光变色性能，它能够通过两种不同波长的激发光——488nm和405nm，精确地控制荧光的开启和关闭，展现出非凡的动态控制能力。更为惊人的是，Dronpa荧光...
这一类具有独特颜色转换特性的光学指示剂会成为亚细胞器乃至整个细胞光学标记的最佳选择。显示的是光转化前后Kaede蛋白的吸收、发射光谱曲线和细胞中两种颜色荧光融合的动态图像。分别用绿色的虚/实线代表转化前Kaede蛋白的吸收/发射曲线，用红色虚/实线代表转化后Kaede蛋白的吸收和发射曲线。由图可以看出，经过...
Dronpa荧光蛋白惊人的特点是可以在488nm下快速漂白，并且随后又可以在405nm激发光刺激下完全恢复。这种模式的光漂白和活化可以反复进行。显示了转基因细胞中Dronpa蛋白在光漂白和光活化之间的可逆转换。该细胞被转染了只含有Dronpa蛋白基因（没有其他融合基因）的质粒并在细胞培养瓶中培养。最初在488nm下标本...
1、膜会有自发荧光 期刊杂志要求: 例如nature中“Image Integrity and Standards”中鼓励在一张印迹膜上进行内参和目的蛋白的检测,同时使用合理的标准化方法:例如:全蛋白归一化。 化学发光属于酶促反应,动态范围窄,只能在实现定性分析,一次只能检测一个信号,如要检测多个信号,需要剥离和重孵育,如使用胶片成像,还需要...
与合作团队前期发表的被广泛使用的mEos3.2 (Nature Methods,2012) 相比较,pcStar荧光蛋白探针具有发光早,光转化效率高等特点,有利于提高单分子超分辨成像技术的时间分辨率和标记密度(图1),同时可以应用于对短寿命生物分子/结构的超分辨成像。应用新一代单分子定位超分辨成像探针pcStar,课题组成员在细菌、真核细胞系...
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