提RNA反转录测实际测的是mRNA，最终结果表现的是细胞的转录水平差异。而直接测DNA实际是基因组定量，最终结果表现的是基因在细胞中的拷贝数。
设计qPCR的引物时，还要跨越外显子的。因为内含子比较大，所以短片段才是来源于mRNA。
我的理解是提取的RNA在反转录成cDNA就没有内含子了，只包括外显子，而gDNA里有外显子和内含子，还没...
博凌科为-为你解答：可以做内参来矫正，先做半定量吧，先把内参矫正了再说你的cDNA纯化过没有？没有纯化测OD是命运意义的
不需要做标准曲线吧?我没有调RNA浓度，你调了也作用不大，毕竟你做反转录是mRNA的反转录，你如果调总RNA的浓度也没多大用啊。如果是mRNA浓度调到一致还是可以的。
如果你想要得到mRNA的绝对含量，就要做绝对定量，你要有标准品，用标准品做标准曲线，然后根据曲线的斜率和截距计算你的样品的mRNA含量，具体的计算方法你可以上网去查查绝对定量的计算，主要是你的标准品要好
检测表达变化自然要先提取RNA再反转录成比较稳定的cDNA。如果你要检测基因突变（可查询肿瘤基因检测相关...
首先你要明确qPCR的目的是什么？做定量PCR是为了检测mRNA的表达量，如果提了genomic DNA又有何意义呢？
要测定目的基因的表达量,通常在荧光定量PCR中使用cDNA作为模板。这是因为cDNA是从RNA反转录而来的,可以反映RNA的表达水平。 如果你直接使用基因组DNA作为模板,对基因表达的定量分析会受到基因组DNA的数量和复杂性的影响,而不是真实的基因表达水平。基因组DNA包含了所有的基因副本,而且可能还包括非编码区域,这会干扰到...
cDNA，只有能够转录作为翻译模板的DNA才能够反应表达量