使用增强化学发光试剂(SuperSignal West Pico,Pierce,Rockford,IL,USA)可视化蛋白条带,图像通过化学发光成像系统(Bio-Rad,赫尔克利斯,CA,USA)捕获。蛋白条带的光密度通过ImageJ软件进行半定量分析,表达为目标蛋白与内参或总蛋白的比值。 小胶质细胞中UCP2亚细胞定位的分析 将BV2小胶质细胞接种于24孔板(105个细胞/孔)...
12.将测得的OD值带入BCA标准曲线计算出蛋白浓度,将浓度最小的数值作为统一浓度,算得一个蛋白和裂解液共100ul的上样体系,在该体系中加入25ul5X蛋白上样缓冲液(5X loading buffer),用手指轻弹PCR管混匀; 13.将装有上样体系的200ulPCR管放入水浴锅中95-100°C变性10分钟,变性后所得样品即可用于SDS- PAGE凝胶...
(3)ImageJ最坑爹,它用魔棒选取区域测定灰度,可是有时很难选中所需区域,而且方法繁琐,不推荐!! 分析蛋白灰度教程•说明:目的蛋白的灰度=目的蛋白IOD值/相应内参IOD值•1.使用Photoshop剪切出目的区域(只含westernbolt条带,如图),保存为TIFF格式文件。 打开文件,剔除背景:(1)放大镜放大目的区域 (2)Measure---...
图3B可以展示,在激动剂刺激后ERK1/2活性使用Western印迹检测并进一步用ImageJ定量。将测量结果针对不同浓度的[Ca 2+ ] o 或[Mg 2+ ] o 绘图,并拟合到希尔方程。图3C可以展示hCaSR-ECD同二聚体结构中鉴定的金属结合位点。Mg 2+ 和Gd 3+ 分别被描绘为桃红色和深蓝色的球体。Gd 3+ (σ=8.0)的异常...
通过10%SDS‑PAGE分析样品,并使用0.1%考马斯 亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)R‑250、20%(v/v)甲醇和10%(v/v)乙酸使其显现。将对 应于约32kDa的主要交联珠蛋白链的蛋白质条带从SDS‑PAGE凝胶切离,切割成立方体(1× 1mm),并且用50%乙腈/20%50mM碳酸氢铵溶液脱色。将脱色的凝胶立方体在37℃利用在 ...
通过SDS‑PAGE(15%分离凝胶)分离等量的蛋白质(20μg)。对于数据分析, ImageJ用于检测每个蛋白质条带的整合密度, 并且通过与阳性对照比较来计算Champ肽的比率和半衰期。如图14所示, 本文提供的多肽(例如, RJK001)可以提高来自白内障患者的晶状体的晶体蛋白的溶解度。 [0242]接下来, 将在手术期间取出的白内障晶状体...
利用ImageJ软件获得CNV区域。 [0116] 结果 [0117] Tf-T蛋白质的牛产和提钝:在制各和测试的三枇Tf-T中得到IOOKdaTf-T蛋白质的单一条带。用所描述的方法产生的Tf-T具有类似的荧光和圆二色性谱。 [0118] 肿瘤抑素和Tf-T蛋白质的表征:SDS PAGE中IOOkDa和28kDa的单一条带和在SEC的单峰显示Tf-T和肿瘤抑...
(Pre)中,通过ImageJ软件定量的每只动物在横跨整个脑的5个等间隔切片中海马(HC)和新皮质(NC)中的Aβ斑块的面积分数、密度和尺寸的分析,显示了(a)使用刚果红染色可视化的Aβ斑块沉积(标尺条=1mm);组之间刚果红染色的斑块的(b,左图)面积分数、(b,中图)斑块密度和(b,右图)尺寸的比较;(c)用抗体6E10免疫...
蛋白质印迹上的蛋白条带密度使用Li-COR Image studio软件或NIH ImageJ软件测定,然后通过各样品中的Actb水平标准化。数据表示为3个样品/各组的平均值 ± SEM。 统计学分析 如适用,进行Student’s t-检验以确定两组之间的统计学差异。低于0.05的P值被认为是显著的。 结果和讨论:线粒体功能 为测试在培养的人肾...
Western blot检测结果显示,点眼后2个月拉坦前列腺素组实验兔球结膜组织中MMP-1和MMP-3蛋白表达条带灰度均强于空白对照组和盐酸卡替洛尔组(图2)。3个组MMP-1和MMP-3蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=26.980、20.586,均...