1.收获目的细胞:按照转染需要的细胞量进行计数,如20 µl电转体系可转1x104-1x106个细胞,100 µl电转体系可转1x105-1x107个细胞; 2.混匀:低速离心,尽量吸去细胞上清,用电转Buffer重悬细胞,加入转染杯,加入准备好的质粒DNA,轻轻混匀,避免产生气泡; 3.电转:将转染杯放入转染仪,按键选择相应程序,按"sta...
(5):72-76.Han X,Hu X M,Yuan J T,et al. Comparative analysis of the transfection efficiency of chicken HD11 cell line by different transfection methods [J]. AnimalHusbandry & Veterinary Medicine,2017,49 (5):72-76.鸡巨噬细胞 HD11 不同转染方法的比较分析韩笑 1,2 ,胡序明 1,2 ,袁君婷...
23、技术转染pcDNA TM 6.2-GW/-miRNA 干扰载体进入淋巴细胞,通过荧光显微镜观察EGFP 的表达确定转染效率约60%,见图5。 2.64种转染方法转染淋巴细胞转染效率比较用上述4种不同的方法转染淋巴细胞,发现其转染效率各有不同,图6为各种不同转染方法之比较,显示核转技术转染淋巴细胞的效率最高。 3讨论基因转染的方法很多...
针对不同类型的细胞,实验首先对核转染法和电穿 孔法的转染参数进行了系统的摸索和优化,然后将优化后的核转染法、电穿孔法与脂质体法在可控实验条件 完全一致的情况下进行了转染对比实验,分析比较了转染 48 h 后的绿色荧光比率和细胞存活率。结果显示, 核转染法转染胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞和卵丘颗粒...
U937单核细胞几种不同转染方法的比较
去除PBS,将 THP-1单核细胞不同转染方法的比较实验所用试剂与仪器 预先准备好的含DNA的STBE溶液均匀滴加到细胞表面。 试剂与仪器 来源 细胞培养箱内孵育30rain,孵育期间经常摇动培养板 以保 人单核细胞系THP-1 上海细胞所 持所有细胞湿润。最后缓慢加入细胞培养液(约稀释DNA的 RPMI1640培养基、胎牛血清 Gibco...
1 不同转染方法对转染效率的影响 p CX2E GF P 在转染 12 h 后开始在细胞内表达 。 对比悬浮法及贴壁法转染后 48 h 的转染效率 ,荧光 差 ,所以必须与银染技术结合使用 ,本实验通过银染技术来寻找凝胶之间差异蛋白质点 ,通过考马斯亮 蓝染色富集差异蛋白质点做质谱分析 。本实验成功建立大鼠脊神经蛋白质组...
目的采用3种不同方法转染原代人外周血单核细胞,以寻找一种简便、高效的单核细胞转染方法。方法采用人淋巴细胞分离液从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝拒染法检测细胞存活率。单个核细胞在孔板内培养2 h后吸弃悬浮的淋巴细胞,获得贴壁的单核细胞。分别采用Lipofectamine 2000介导载体质粒(PEGF-N1),慢病毒(NC...
其中DEAE-葡聚糖介导的细胞转染方法虽然建立较早,但在国内应用很少。目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒(pEGFP-N1)转染人THP-1单核细胞,以获得较高转染效率的方法。方法:分别采用DEAE-葡聚糖、Lipofectamine 2000、FuGENE 6、梭华-Sofast转染试剂不同方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒进行...
转导作用(transduction):自然界中,通过噬菌体或病毒的感染作用将一个细胞的遗传信息传递到另一个细胞的过程称为转导(transduction)。即通过噬菌体(病毒)颗粒感染,把DNA导入被感染的宿主细胞的过程。转染作用(transfection):转染作用是将外源DNA分子导入真核细胞的过程,原核生物中转化的同义词。