24.实施例6 不同引物测定结果的比较用dnasei酶(0.08u/μl)处理纯化aav样品,37℃消化30分钟后98℃10分钟灭活消化;然后病毒裂解液proteinase k消化后,稀释样品,分别用目的基因特异性cmv引物和通用性itr引物进行qpcr体系扩增,用实施例1的方法进行qpcr定量检测。结果表明通用itr引物qpcr定量滴度比目的基因特异性引物定量滴...
43.尽管现有技术中通过使用双aav载体系统,可以将aav病毒载体的装载容量提高到8kb、甚至更高,但是在多重aav载体滴度难以准确测定,用于检测多重aav载体特别是双重aav病毒滴度时,两种病毒各自滴度的引物分别来自于特异性针对cmv和特异性针对sv40 polya的引物,由于sv40 polya序列较短,检测所用引物位置靠近特殊结构元件itr,...
1.一种多重aav病毒滴度的检测方法,所述多重aav病毒包括第一腺相关病毒和第二腺相关病毒;所述第一腺相关病毒包括位于两个itr序列之间的第一基因表达框,所述第一基因表达框按5’至3’方向依次包括转录起始元件、第一目的基因片段、第一剪接供体信号片段、第一滴度校准片段,所述第一目的基因片段为目的基因5’端...