一、大部分的基因都有beta-action基因和GAPDH基因,很多Affymetrix芯片都将它们设为一组观察RNA降解程度的内参基因。mRNA是按照5’至3’的顺序来降解的,通过比较它们3’相对于中间或者3’相对于5’的信号强度,可以很好地指示出试验质量。 二、beta-action基因对应的探针组: AFFX-HSAC07/X00351_3_at AFFX-HSAC07...
今天我就跟大家一起探讨一下两大内参 Beta-actin 和 GAPDH 使用的局限性。 Beta-actin: 脊椎动物 actin 分为 α、β和γ 三种类型,α 型主要表达于心肌和横纹肌细胞中,β及γ 型主要表达于非肌细胞中 (这句来自百度百科)。那么 Beta-actin 的局限性具体体现在哪里呢?Angela Dittmer 等人通过使用不同抗体...
常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参 00分享举报您可能感兴趣的内容广...
GAPDH 是代谢类蛋白,在活组织中表达比较恒定。但是做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,GAPDH表达量有可能会受到诱导处理的影响。而Actin 和Tubulin 是结构蛋白,不同组织的细胞结构会有差异性,如脑组织的 Tubulin 的表达会高一些(因为神经细胞的轴突和树突都由 Tubulin 维持结构),而 Actin 的表达量可能会低一些...
beta-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富。尽管最近有一些文章已经开始质疑beta-actin作为内参的有效性(好像是对于上样量>20ug的蛋白区分能力下降,记不清楚了),但是发文章应该还是没有问题的。至于其他的内参也是可以考虑用的,GAPDH(甘油醛-3-磷酸...
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2)本产品仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗、食品或药品等。 您可能感兴趣的抗体 产品货号抗体类别规格FI01101GAPDH小鼠单克隆抗体100μL /500μL /1mLFI01102α-Tubulin小鼠单克隆抗体100μL /500μL /1mL 辉骏实力 4688+客户已添加微信获取beta Act...
是不是beta-actin一抗给错了? 给的是beta-tubulin? 谢谢你的回答,一抗倒是没错,用的是sigma的,研究室其他人都有用,不知道为什么就是出不来40kda左右的。 后来重新做了一次,这次选了GAPDH的单抗,37附近的条带是出来了,但是同时在50-75一间也出现了一条带 ...
应用一步法荧光标记逆转录-聚合酶联反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测了大鼠死后不同时间间隔脑、肝、脾、肾管家基因磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)及β-肌动蛋白(β-actin)mRNA的降解情况,旨在为PMI推断提供一种新的指标。
key roles in regulating apoptosis and aging. Beta actin is one of six different actin isoforms which have been identified. Like GAPDH, beta-Actin is constitutively expressed at high levels in almost all tissues and cell lines making it ideal for use as a loading control marker in immunoblots....
【求助】beta-actin都发不出来。。。 刚刚开始做western blot,骨骼肌的蛋白。跑胶,转膜,敷抗体,一张膜发了5次,第一次片子曝光了,第二次只有很脏的背景,没有条带,然后第三次到第五次发光就是白板,没有任何的影。抗体最后达到1:1000,1:2000还是没有!以为是抗体和显影液定影液的事情,结果别的人跑的膜就能...